金誉彩票

您好,欢迎进入上海丰寿实业有限公司网站!
一键分享网站到:
您现在的位置:首页 >> 技术文章 >> 您知道细胞冻存与复苏吗
您知道细胞冻存与复苏吗
浏览次数:208发布日期:2019-05-05

小编给大家讲讲细胞冻存与复苏 。 

细胞冻存

1. 实验前准备:细胞室及工作台紫外线照射15min;培养液、PBS、胰酶、小牛血清、DMSO、恒温水浴箱37℃预热备用;收集对数生长期细胞,在冻存前一天zui好换液

2.用吸管吸出培养瓶中的细胞培养液,PBS清洗2遍吸出冲洗液,加入适量胰蛋白酶消化。

3. 适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。吸管吸取培养液吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。

4. 用吸管将培养液加入冻存管中,离心(1000r/min,10分钟)。

5. 去上清液,加入与细胞悬液等量的冻存液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀

6. 冷存管置于4℃10分钟----20℃30分钟----80℃16~18小时(或隔夜)---液氮槽vaporphase长期储存。-20℃不可超过1h,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

7.记录每一个冷冻管的位置以确保在以后应用时能够找到每一个冷冻管。

细胞复苏

1.室内紫外消毒;培养基、PBS于37℃恒温水浴预热备用。

2.自液氮罐中取出冷冻管,立即放入37℃水槽中快速解冻,离心。

3.去上清,加入培养基,吹打,然后移入培养瓶中,用培养基清洗冻存管,清洗液也移入培养瓶中。

4.于培养瓶中加入适量培养基,放入CO2培养箱中培养

5.记录复苏日期;次日换液。

    QQ在线客服
  •   在线咨询
  • 点击这里给我发消息
电话
021-54845833
手机
021--54845833
友情链接:大无限彩票官网  天天彩票注册  幸运彩票官网  M5彩票官网  J8娱乐彩票官网  M5彩票开户  凤凰娱乐彩票  金誉彩票开户  J8娱乐彩票注册  杏彩彩票注册  

免责声明: 本站资料及图片来源互联网文章,本网不承担任何由内容信息所引起的争议和法律责任。所有作品版权归原创作者所有,与本站立场无关,如用户分享不慎侵犯了您的权益,请联系我们告知,我们将做删除处理!